实时监测GPCR激活引起的细胞微小形变
当细胞外信号分子与GPCR结合时,细胞形态会发生微小的变化。这些变化通常发生的很快,但可能会持续几分钟到几小时,并伴随着显著的生理状态改变。
Axion BioSystems的 Maestro Z系统提供一个基于阻抗的细胞分析平台,可用于实时、连续、无标记地监测GPCR信号激活引起的细胞形态改变。
应用案例
高灵敏度地实时监测GPCR激活引起的细胞微小形变
GPCR是跨膜受体中数量最多的一类。 GPCR的激活往往引发细胞的构象变化。基于此现象,我们可以通过阻抗测量来检测GPCR的激活。
Calu-3细胞被接种到CytoView-Z板中,并在Maestro Z系统上连续监测阻抗,跟踪Calu-3细胞对异丙肾上腺素、组胺和细胞松弛素d的动态反应,并揭示每种化合物的细胞反应动力学的重要信息。
如A图所示, 我们将Calu-3细胞培养在阻抗检测板中, 随后加入不同浓度的异丙肾上腺素(一种强效β肾上腺素受体括抗剂, A图中青色所示)并观察阻抗值的实时变化。如果我们将20分钟时间点的数据做成柱状图(如B图所示), 可以看到最高药物浓度组的阻抗值在那时已经降到了最低, 而最低药物浓度组则已经恢复到了基线值。我们还可以探索不同化合物在激活GPCR时细胞的差异性反应。如C图所示, 橘色标识的组胺处理组(100µM)很迅速地出现了短时间的阻抗值降低而又迅速恢复;而灰色标识的细胞松弛素处理组, 由于其细胞周期停止及肌动蛋白合成受抑制, 则表现出前高后低的阻抗变化规律。