综 述
实 验 设 计
MEA 数 据
1)类器官建模及质控
上图中的MEA实验结果证明:类脑器官形成的神经网络,有着自发且同步的神经元发放和簇放电(A和B图的左侧部分);右侧的药理学实验*则说明CNQX(谷氨酸能神经元抑制剂)能够几乎完全抑制这种神经活动,而bicuculline(GABA能神经抑制剂)则无类似作用。
*10mM的CNQX或者10mM的bicuculline加入到样本孔后,立即开始MEA电信号记录。
2)模拟病毒感染及测试抗体效用
HCMV感染对于类脑器官功能的影响
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分组情况:类器官诱导分化45天后,依次加入IgG抗体(C图-左)、HCMV毒株TB40/E和IgG抗体(C图-中)以及HCMV毒株TB40/E和中和抗体Nab 1B2(C图-右)。不同分组样本的MEA记录安排在病毒感染处理后的2周,记录时长为100s。(均值 ±SD, ***p < 0.001, 复孔数n = 3。进行放电同步性分析时,软件的同步窗口被设定在20ms。)MEA实验结束后,继续对样本进行了原位相差GFP荧光成像实验。
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对照组(C图-左)类脑器官的MEA分析表明,样本已经有同步发放和簇放电现象。相比之下,TB40/E感染组(C图-中)的神经网络活动(包括发放数量、平均放电率和同步指数)就明显降低了。和钙流实验中观察到的现象类似,1B2 Nab(C图-右)能够在很大程度上逆转TB40/E所导致的神经网络障碍。
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图D是针对采集到的MEA数据,选取有代表性的参数进行分析:从左到右依次为:每分钟发放数量、簇内发放数量、平均放电率和同步性参数。这些结果可以看出抗体处理后,样本的电生理表型就变得和对照组很类似了。
结 论
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