由胚胎干细胞（ESCs）和诱导多能干细胞（iPSCs）组成的人类多能干细胞（PSCs）为心脏细胞治疗的临床试验打开了一扇崭新的大门。然而，由于不同分化批次中残留的未分化PSCs具有增殖能力，在进行细胞移植后有形成畸胎瘤的风险。

2021年8月，斯坦福心血管研究所的Joseph C. Wu教授团队在《JCI Insight》(IF 8.315)发表文章“Method for selective ablation of undifferentiated human pluripotent stem cell populations for cell-based therapies”。他们提出，低剂量的阿霉素可靶向去除未分化的干细胞，为细胞移植提供更纯净的终末分化心肌细胞群，并证明这种处理能有效防止细胞移植后畸胎瘤的形成。

1.首先，作者使用0.01、0.05、0.1、0.5和1μM浓度的阿霉素分别处理ESCs和ECS-CMs。48h后观察到，仅0.01μM的阿霉素能够选择性地消除ESCs，而对ECS-CMs活性无影响。

2.在此基础上，作者使用0.01μM阿霉素处理了hiPSC来源的平滑肌细胞以及hESC来源的内皮细胞等多种样本，得到了类似的结果。这意味着此方法对于不同种类和来源的细胞有一定的适用性。

3.随后，作者在该剂量阿霉素处理第30天对ESC-CMs进行收缩力测定，检测结果显示，处理组与对照组的收缩速度、舒张速度、收缩持续时间及舒张持续时间均无明显差异。

4.接着，作者测试了该剂量阿霉素对ESC-CMs电生理表型的影响。

Fig.1  0.01μM阿霉素处理ESC-CMs的电生理评估

选择Axion BioSystems公司的Maestro Pro高通量MEA系统进行细胞电生理记录：

1.使用Accutase（Sigma）酶解人源ESC-CMs后，置于含B-27（50X，Gibco）的 RPMI-1640 培养基（1X，Gibco）中重悬；

2.将48孔MEA板(16电极/孔)用基质胶包被，取8uL细胞悬液种板，并置于Maestro Pro设备中，设定环境条件为37°C 和 5% CO2；

3.孵育1h后，每孔再加入200ul培养基继续培养；

4.种板后第14天记录ESC-CMs电活动；

5.使用Maestro Pro高通量MEA系统的LEAP 功能诱导出动作电位。LEAP potential duration（LPD）即为Action potential duration（APD）；

6.最后通过 AxIS Navigator软件 (Axion BioSystems) 进行数据分析。