摘要

近年来，由于CAR-T细胞疗法在血液系统恶性肿瘤领域的出色疗效，不少研究机构进而尝试将该疗法应用于实体瘤治疗。有文献报道，肿瘤抗原DNAJB8对于癌症干细胞/癌症启动细胞（CSCs/CICs）的致瘤性起关键作用。但是该抗原主要定位于细胞核和胞质中，很难将其直接用作CAR-T的靶点。来自日本札幌医科大学的研究者们发现，在HLA-A*24:02分子存在的条件下，CSCs/CICs可将DNAJB8衍生物(DNAJB8-143)呈递到细胞表面。在此基础上，他们设计开发了靶向DNAJB8-143的CAR-T细胞（B10 CAR-T），并采用多种技术分析了它们在体外和体内的杀伤效力。

研究者首先将HLA-A*24:02和DNAJB8双阳性的肾癌或骨肉瘤细胞系与B10 CAR-T混合培养一段时间后，借助流式技术检测到了后者分泌的激活标志细胞因子CD107a和IFN-γ。接下来，他们在Maestro Z阻抗平台上观察到B10 CAR-T能够迅速杀伤两种骨肉瘤细胞系（KIKU和Saos-2）。LDH分析结果也显示出该效应细胞对KIKU和肾癌细胞系CAKI-1的毒性。最后研究者将它们移植入多个骨肉瘤和肾癌小鼠模型中，也检测到部分或全部肿瘤细胞被清除。上述结果共同证明了B10 CAR-T在体外和体内对肾癌和骨肉瘤细胞均具有特异性细胞毒性，可以作为治疗这两类实体瘤病人的候选免疫疗法。这一研究成果发表在了British Journal of Cancer (IF 8.8)上。

阻抗实验

 

 

      研究者借助Maestro Z阻抗检测平台，将2种靶细胞分别接种于Cytoview Z细胞板各孔中。种板24h后，按照 10:1、5:1 和 1:1 的 E:T 比例加入B10 CAR-T细胞。效靶比为0:1的组只加入与效应细胞相同体积的培养基，做为靶细胞对照。图A、B截取了加入效应细胞3h以后，各组阻抗值随时间变化趋势图。这一结果显示出B10 CAR-T对两种靶细胞均有明显的细胞毒性，并且效靶比越高，杀伤效力越强。

图S2 三个效靶CAR-T细胞杀伤两种骨肉瘤细胞系KIKU（A）和Saos-2（B）阻抗变化曲线

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